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科研工具丨作图丨实验丨SCI丨统计分析丨国自然
本期的猪脚是糖尿病这个精神分裂，不过今天要介绍的是糖尿病溃疡伤口模型，进阶详细案例版！跟着我的节奏，一起来！咚次哒次、咚次哒次……
首先，要了解糖尿病慢性溃疡的发生机制
糖尿病患者由于发生微血管和周围神经系统病变会导致皮肤营养障碍，出现皮肤受损，激发感染等情况，且一旦感染，创面修复能力极差，容易引起极难愈合的溃疡伤口。
慢性皮肤溃疡是常见的外壳疾病，而糖尿病皮肤溃疡是其中的一种，具有反复发作，长期不愈的特点。糖尿病患者在发生皮肤感染后，会加重糖尿病的症状，并且不容易控制，如果治疗不及时就会向纵深发展，甚至会导致截肢。
本实验首先复制了糖尿病大鼠造模实验，然后在糖尿病大鼠侧后背造成直径2cm的圆形创口建立糖尿病慢性溃疡模型。
接下来，实验开锣
糖尿病大鼠模型的建立1：
01、实验动物
SD大鼠，体重-克，8周龄。
02、实验试剂
1）STZ(链脲佐菌素)无色固体2-8℃干燥避光保存，℃可分解为气体水溶液不稳定，溶于双蒸水或盐溶液。但在低温下pH4-4.5是较为稳定。
2）柠檬酸钠，柠檬酸用于调制缓冲溶液。
03、实验器材
1ml注射器，大鼠固定器。
04、试剂配制
1）柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液（pH=4.5.0.1mol/L）配制0.1mol/L柠檬酸钠溶液，在用柠檬酸和氢氧化钠调节pH至4.5。
2）称量mgSTZ溶解于10ml柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液，配制成14mg/mlSTZ溶液。
05、动物分组及造模
1）大鼠自由摄食，饮水，动物房保持室温20-25℃，并维持一定的光照。三天后，将大鼠随机分为实验组和对照组。
2）所有大鼠实验开始前12小时开始禁食但不禁水，禁食时间可根据情况顺延至18小时，但不要超过24小时。
3）将配置好的STZ溶液用锡箔纸包裹做避光处理并保存在冰水中，并在配制成功后30分钟内完整注射造模。
4）称量大鼠体重，采用腹腔注射给药进行造模，剂量为70mg/kg。对照组注射等量的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液。
06、模型指标检测
血糖测定：实验过程中腹腔注射STZ48小时和72小时分段测定大鼠血糖并记录，采用剪尾采血法，使用血糖试纸进行检测。
※两次检测血糖浓度均高于16.8mmol/ml，即可认为造模成功。
07、后期饲养
糖尿病大鼠会有很明显的“三多一少”症状，所以尽量分笼饲养，勤换垫料，并保证足够的饲料和饮水供给。
糖尿病大鼠慢性溃疡伤口模型2
01、实验动物
SD糖尿病大鼠（八周以上大鼠，并糖尿病造模时间超过1周并少于2周）普通SD大鼠（八周以上，时间相近）。
02、实验试剂
1）水合氯醛（或戊巴比妥钠）用于麻醉实验大鼠。
2）医用酒精，表层消*。
3）龙胆紫（或苦味酸，碘酊）创口标记染液。
4）试纸，标记创口，提前裁成直径为2cm的小圆片，并浸入标记染液中。
03、实验器械
手术剪，眼科镊，剪毛剪，（需提前高温灭菌）。
04、造模
1）麻醉：
将大鼠称重并按mg/kg水合氯醛或40mg/kg戊巴比妥钠腹腔注射麻醉。
2）创面制作：
1.将麻醉好的大鼠腹面朝下固定板上，固定四肢，在其背部侧面剪毛备皮，可以偏向背部，避免大鼠抓绕影响实验。
2.常规消*，用镊子夹取浸入龙胆紫溶液的直径2cm的滤纸贴于剪毛区，轻按纸片，使大鼠悲伤印上与纸片大小形状相同的标记区域。
3.用剪刀沿标记边缘线剪去标志区表皮。
3）后期饲养观察：造模后的大鼠单独饲养，注意更换垫料保持环境干燥清洁。造模后，每隔两天，测量伤口直径，计算创面面积，并记录数据，绘制愈合速率曲线。
比糖尿病模型高卡斯一点的糖尿病慢性溃疡动物模型就是这么的构建出来了。也不是很难啊，是不是？实在搞不定可以找专业人士帮忙，中洪博元动物造模可不是盖的
中洪动物造模实验服务
一、服务项目
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1.构建模型；2.药效学评价，动物组织及血液标本采集；
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中洪动物造模实验示例
裸鼠成瘤（中洪实拍，盗者必究）
大鼠脑缺血再灌注（中洪实拍，盗者必究）
视网膜缺血再灌注（中洪实拍，盗者必究）
动物房一隅（中洪实拍，盗者必究）
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、，连续两年的课标卷传递同一个信息，知识考察一定是基础，注重学生长期学习过程中养成的学习与思维习惯，进行核心能力区分。
实验的基本构建，是一个标准化的构型：
1.探究自变量影响因变量。
2.分组开展实验。（对比实验、对照实验）（适量……等量……）
3.实验结果的统计及分析。
4.实验结果预测：若……则……
5.根据题干倾向性，做出合理结论。
实验的描述结构是标准的，验证实验的现象是明确的，课本若干实验留给我们的就是方法。探究开展的核心就是站在新技术、方法的基础上推动前人研究的深度。通过对实验设计思路的总结，找到实验开展的切入点。能否有这样的能力，就是高校选拔的标准。
科学思维和科学探究:高中生物教材涉及的
科学方法及技术归纳
来源：导与练
(1)显微观察法——观察多种多样的细胞、观察线粒体和叶绿体、观察细胞有丝分裂、减数分裂、观察质壁分离及质壁分离复原、观察染色体变异等。
(2)离心法——差速离心法分离各种细胞器、制备细胞膜等;密度梯度离心法证明DNA半保留复制(重带、轻带、中带)等。
(3)对比实验法——设置两个或两个以上的实验组通过相互对照并分析,探究某种因素对实验结果的影响,如探究酵母菌细胞呼吸的方式、酶作用特性相关实验、探究生长素类似物对扦插枝条生根的最适浓度以及探究影响酶活性的最适温度和最适pH等。
(4)放射性同位素标记法:分泌蛋白的合成与运输、14C标记CO2探究卡尔文循环过程、噬菌体侵染细菌实验(32P、35S)、基因诊断等。
(5)细胞染色法——活细胞染色(健那绿染色线粒体);碘染色法(证明光合作用产生淀粉);死细胞染色(醋酸洋红、龙胆紫、改良苯酚品红染液、吡罗红甲基绿染色剂);台盼蓝染色法鉴定细胞死活。
(6)物质的提取和分离——纸层析法分离绿叶中的色素,萃取法提取胡萝卜素。
(7)调查法——样方法和标志重捕法估算种群密度;取样器取样法调查土壤小动物类群丰富度;抽样检测法探究培养液中酵母菌种群数量变动。
(8)假说—演绎法——孟德尔两大定律的发现;摩尔根证明基因在染色体上(用白眼雄果蝇为材料);DNA半保留复制方式的证明。
(9)类比推理法——萨顿提出“基因在染色体上”。
(10)模型构建法——物理模型:细胞亚显微结构模型,DNA分子双螺旋结构;概念模型:光合作用图解模型,血糖调节过程概念图等;数学模型:种群增长两种数学模型(公式、“J”型、“S”型曲线),种群基因频率及基因型频率变化的数学模型等。
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